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用750g、口径4cm的瓶,也可采用广口瓶或罐头瓶。拌料装瓶主料与辅料等先拌匀,把糖溶于水中而后逐渐加入料中并充分拌匀,每100kg干料加水140?160kg,以手紧握料指缝中有少量水滴下为宜。采用徒手或装瓶机分装,要求松紧适中,直至离瓶口1cm处,压平,中央用捣木打孔至瓶底,洗净瓶口、瓶壁污物,瓶口用牛皮纸包好。灭菌接种常压100兀灭菌,持续8?12h,高压灭菌121兀,保持1.5h。待冷却后,在无菌条件下接入菌种。然后放到培养室,控制温度25兀,室内相对湿度控制在70%以下。培养室内保持黑暗状态,以利菌丝生长。一般经20d发菌培养,当菌丝长至1/2瓶时,可以除去封口纸,搬至于实体发生室。此时控温25兀?28兀,相对湿度增至90%~95%,保持空气清新,增强漫射光。菌盖不断生长,直至四周白色生长圈消失,即停止生长扩大,但仍可继续加厚。子实体形成菌管,弹射出红褐色孢子。
神经保护作用灵芝抱子对神经系统有一定的保护作用.Zhou等30研究发现,给大鼠服用高剂量(8g/kg/d)的灵芝抱子粉可以使大鼠海马区谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧酶(GSH/GR)和丙二醛(MDA)恢复到正常水平,保护大鼠的海马区神经细胞,从而减少阿尔茨海默病的发生.Gokce等[31观察到,给予脊髓损伤大鼠灵芝多糖后,其能够减少组织中半胱氨酸蛋白酶-3、肿瘤坏死因子a、过氧化物酶、丙二醛和一氧化氮的水平,从而保护脊髓损伤神经细胞.保肝作用相关研究表明,灵芝抱子具有护肝、保肝作用.Jin等固研究发现,灵芝抱子粉对镉(Cd)引起的肝损伤小鼠具有保护作用,其作用主要是减少血清中ALT、AST含量和肝脏指数,改善组织的病理状态.胡宗苗等[33观察到灵芝抱子对CCl4肝损伤小鼠的纤维化保护作用,经灵芝抱子治疗后可显著降低小鼠血清中ALT和AST含量,升高肝组织中SOD含量,降低MDA含量,组织病理学显示,灵芝抱子可使肝纤维化程度降低,且肝组织中MMP-9蛋白表达显著降低,提示灵芝抱子可能通过调节MMP-9蛋白来改善肝纤维化.
使用高质量的塑料袋,减少孔使用产品质量可靠、稳定的厂家生产的塑料袋,厚度要求0.035mm~0.05mm,装袋、灭菌、接种及运输过程中要轻拿轻放,发现被段木块刺破的菌袋,须用纸胶布或透明胶布粘住菌袋砂眼或孔。灭菌彻底灭菌仓内叠放料袋时要堆叠合理,纵向每4排料袋约宽60cm作为一行,行与行之间要留有空隙,以使蒸汽均匀循环。用旺火烧到罩膜鼓起时,排出冷空气,当罩膜内温度达到100P时,连续保持24~30h,才可以停火降温;注意加温过程中要适时加水,保持水在规定的水位范围内,加水过程中要保证罩膜内温度不下降。灭菌时,防止灭菌罩膜漏气,要注意蒸汽炉的蒸汽发生量与灭菌物数量相匹配,灭菌袋数增加,应相应延长灭菌时间。接种时防止料温太高料温太高,超过38t,易烧死菌种,是在灭菌后的料袋还有余温(32~35t)时接种。提供适宜的培菌环境在培养室或塑料薄膜大棚内暗光培养,保持七分阴三分阳,以利菌丝生长。鼠害。发菌阶段,要定期检查、翻堆、通风,严防料温上升到32t以上而出现“烧菌”现象;发菌期间培养室(棚)内温度低于20t,可用火加温,每天中午通风1~2h。菌丝爬满木段后,再在弱光环境中培养20d以上,促使菌丝老化,培菌时间需2~3个
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